تشخيص عفونت HIV-1 و HCV مشاهده در قالب پی دی اف چاپ فرستادن به ایمیل
نوشته شده توسط Administrator   
پنجشنبه ، 18 تیر 1388 ، 18:27

 به همت پژوهشگران ويروس شناسي دانشگاه تربيت مدرس، روش MultipleX RT-PCRELISA كه داراي حساسيت و اختصاصيت قابل قبولي براي تشخيص عفونت HIV-1 و HCV مي‌باشد، طراحي شد.

زهرا خانلري :

در كنار حساسيت بسيار بالا، با اين روش هزينه و زمان كمتري براي انجام تست نياز است.

عليرغم غربالگري خون‌هاي اهدايي با روش‌هاي حساس مبتني بر شناسايي آنتي بادي، همچنان خطر انتقال عفونت‌هاي ويروسي وجود دارد؛ بنابراين طراحي روش‌هاي حساس مبتني بر شناسايي اسيد نوكلئيك مورد توجه قرار گرفته است.

هدف از اين تحقيق طراحي روشي حساس‌تر در مرحله شناسايي نسبت به روش‌هاي معمول و همچنين تشخيص همزمان عفونت‌هاي ويروس نقص ايمني اكتسابي تيپ يك و ويروس هپاتيت C در يك نمونه مي‌باشد.


مراحل تحقيق و اجراي طرح

پس از طراحي پرايمرها و پروب‌هاي اختصاصي دو ويروس و بهينه سازي روش واكنش زنجيره‌يي چندگانه، مرحله نشان‌دار كردن محصول با استفاده از نوكلئوتيدهاي متصل به ديكوكسي ژنين انجام شد.

محصول به دست آمده ابتدا به دو قسمت مجزا تقسيم و پس از واسرشت شدن در شرايط قليايي با پروب اختصاصي مجاور شد.

پروب‌هاي حاوي بيوتين انتهايي پس از اضافه شدن به پليت پوشش يافته با استرپت آويدين متصل شدند.

پس از شست‌وشو، آنتي بادي ضد ديگوگسي ژنين متصل به آنزيم آلكالن فسفاتاز به چاهك‌ها اضافه شد. در مرحله نهايي شسته شد و سوبستر اضافه شد. با استفاده از روش رنگ سنجي نمونه‌هاي مثبت و منفي از نظر عفونت قابل شناسايي هستند.


 نتايج حاصل

35 نمونه با روش طراحي شده مورد آزمايش قرار گرفتند كه شامل 27 نمونه مثبت و هشت نمونه منفي تاييد شده بودند و هيچ‌گونه نتيجه مثبت يا منفي كاذب مشاهده نشد.

روش طراحي شده داراي حساسيت و اختصاصيت قابل قبولي براي تشخيص عفونت‌هاي HIV-1 و HCV مي‌باشد. به علاوه امكان كمي كردن روش وجود دارد كه در كنترل بيمار و پايش درمان مفيد است. همچنين در كنار حساسيت بسيار بالا هزينه و زمان كمتري براي انجام تست نياز است.


اين پژوهش با راهنمايي دكتر مهرداد روانشاد ــ عضو هيات علمي دانشكده علوم پزشكي دانشگاه تربيت مدرس - انجام شده است.
 

تبلیغات


آخرین مطالب تشخیص ایدز

پر بیننده ترین مطالب بخش تشخیص ایدز